雙波長(zhǎng)法測(cè)定直鏈淀粉含量

雙波長(zhǎng)法測(cè)定直鏈淀粉含量

因?yàn)橹ф湹矸垡矔?huì)與碘形成絡(luò)合物，這種絡(luò)合物會(huì)和直鏈淀粉-碘復(fù)合物吸收相同波長(zhǎng)的光，從而導(dǎo)致測(cè)定的直鏈淀粉含量比真實(shí)值要高。另外，單波長(zhǎng)法只能測(cè)定谷物中直鏈淀粉含量，而糧食的食味品質(zhì)還與支鏈淀粉的含量及直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例有關(guān)。運(yùn)用雙波長(zhǎng)法可以同時(shí)獲得直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉含量3個(gè)指標(biāo)，省時(shí)又省力，工作效率高，適用于大批量分析。下面我們通過對(duì)雙波長(zhǎng)法測(cè)定原理，以及與用直鏈淀粉含量?jī)x測(cè)定直鏈淀粉含量作比較，來深入了解雙波長(zhǎng)法。

雙波長(zhǎng)比色法原理：如果溶液中某溶質(zhì)在兩個(gè)波長(zhǎng)處均有吸收，則兩個(gè)波長(zhǎng)的吸光度差值與溶質(zhì)濃度成正比。用與待測(cè)樣品相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品配制的直鏈淀粉和支鏈淀粉的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與碘反應(yīng)，然后在同一個(gè)坐標(biāo)系里進(jìn)行掃描(400～960nm)或作吸收曲線，作圖確定直鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)λ2、λ1，支鏈淀粉的測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)λ4、λ3。再將待測(cè)樣品與碘顯色，在選定的波長(zhǎng)處作4次比色，然后利用直鏈淀粉和支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線即可分別求出樣品中兩類淀粉的含量。因測(cè)定的是試樣在兩波長(zhǎng)處的吸光度差值，扣除了兩類淀粉吸收背景的相互影響，故可提高測(cè)定的靈敏度和選擇性。當(dāng)然我們還需利用直鏈淀粉測(cè)定儀測(cè)定的結(jié)果來進(jìn)行比較，以此確定雙波長(zhǎng)法的精確度。

戴雙等通過單波長(zhǎng)法和雙波長(zhǎng)法對(duì)小麥直、支鏈淀粉含量測(cè)定進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，雙波長(zhǎng)法可以有效地排除其他物質(zhì)的干擾，測(cè)定結(jié)果優(yōu)于單波長(zhǎng)法。范明順等采用雙波長(zhǎng)法得到的直鏈淀粉的回收率為95.0%～101.7%，支鏈淀粉的回收率為98.8%～103.2%，表明雙波長(zhǎng)法測(cè)定的結(jié)果重現(xiàn)性較好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1%。另外，如果想要更加快捷、方便的測(cè)定直鏈淀粉的含量，我們可以通過直鏈淀粉分析儀來進(jìn)行測(cè)定。